LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA ORGANIK I : KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS

 

LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA ORGANIK I

"KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS"

SUCI ROHANA PUTRI TAMBUNAN

A1C119050

REGULER B

DOSEN PENGAMPU:

Dr. Drs. SYAMSURIZAL, M.Si

PRODI PENDIDIKAN KIMIA

JURUSAN MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN

UNIVERSITAS JAMBI

2021

VII. DATA PENGAMATAN

NO	Perlakuan	Fungsi Alat dan Bahan	Tujuan	Hasil Pengamatan
1	Siapkan fasa gerak berupa methanol, etil asetat, kloroform dan kloroform : methanol dengan perbandingan 10:1.	Alat : 1.   Botol kaca berfungsi untuk menampung larutan yang akan digunakan dan untuk melakukan proses TLC 2.   Penjepit berfungsi untuk mengambil plat TLC 3.   Lampu UV berfungsi untuk menyinari plat TLC sehingga diketahui jarak tempuh noda 4.   Pensil berfungsi untuk memberi tanda dan titik pada plat TLC 5.   Penggaris berfungsi untuk membuat garis pada plat TLC 6.   Tabung kapiler berfungsi untuk menotolkan sampel senyawa yang tidak diketahui   Bahan 1.  Methanol  berfungsi sebagai fasa gerak 2.  Etil asetat berfungsi sebagai fasa gerak 3.  Kloroform berfungsi sebagai fasa gerak 4.  Kloroform : methanol dengan perbandingan 10:1 berfungsi sebagai fasa gerak 5.  Plat TLC berfungsi sebagai tempat melakukan kromatografi lapis tipis dengan menotolkan sampel dan melihat jarak tempuh noda dan pelarut 6.  Etanol berfungsi untuk membersihkan tabung kapiler sehingga tidak terjadi kontaminasi bahan kimia saat menotolkan sampel pada plat TLC	Untuk menyiapkan fasa gerak dalam kromatografi lapis tipis ini	Masing-masing fasa gerak dalam botol kaca berwarna bening
2	Siapkan plat TLC dengan menggambar sebuah garis dengan jarak 1 cm dari dasar plat secara lembut dengan menggunakan pensil.		Untuk membuat garis pada plat TLC sehingga dapat dihitung jarak tempuh noda dan pelarut pada akhir pemisahan	Permukaan Plat TLC dilapisi silika gel dan jarak garis dari dasar plat = 1 cm
3	Siapkan 4 buah plat TLC. Buatlah 4 buah titik dengan jarak masing-masing 1 cm dan beri tanda A (asetil asetat), C (kafein), P  dan  X serta beri tanda pada pojok kanan atas untuk pelarut atau fasa gerak yang digunakan masing-masing pada 4 buah plat TLC.		Untuk memberi label sehingga dapat membandingkan jarak tempuh noda dan jarak tempuh pelarut untuk menghitung nilai Rf	Jarak masing-masing titik = 1 cm dengan masing-masing titik diberi tanda A (asetil asetat), C (kafein), P () dan  X () serta tanda pada pojok kanan atas untuk pelarut fasa gerak pada masing-masing plat TLC.
4	Ambil salah satu sampel dengan tabung kapiler dan totolkan pada salah satu tanda A, C, P dan X yang telah dibuat dengan lembut dan cepat. Dibersihkan tabung kapiler dengan etanol untuk menotolkan sampel yang lainnya.		Untuk memberi totol sampel pada plat TLC sehingga dapat dihitung jarak tempuh noda. Pembilasan tabung kapiler dengan etanol untuk membersihkan tabung kapiler sehingga tidak terjadi kontaminasi bahan kimia saat menotolkan sampel pada plat TLC	Titik pada plat TLC masing-masing terdapat totol senyawa sesuai dengan tanda. Tabung kapiler yang telah dibilas dengan etanol bebas dari senyawa sebelumnya sehingga tidak terkontaminasi
5	Letakkan plat TLC tegak lurus menggunakan penjepit ke dalam fasa gerak. Jangan biarkan plat TLC bergerak dan terendam karena dapat merusak totolan dan nilai Rf.		Agar proses kromatografi lapis tipis dapat berjalan dengan baik dan sempurna	Fase gerak/pelarut perlahan teradsorpsi oleh plat TLC yang ditandai dengan bergerak naik pada plat TLC Fasa gerak
6	Amati fasa gerak yang naik ke atas plat TLC.		Untuk mengetahui penghentian proses kromatografi lapis tipis
7	Angkat plat TLC apabila fasa gerak telah mencapai jarak 1 cm dari ujung atas plat TLC dengan penjepit. Dibuat garis pada bagian atas batas pelarut dengan hati-hati menggunakan pensil. Lalu, dibiarkan plat TLC untuk menguapkan pelarut.		Untuk memberi batas jarak tempuh pelarut dan membiarkan pelarut menguap	Jarak fasa gerak pada plat TLC = 1 cm dari ujung atas plat dan proses kromatografi sudah dapat dihentikan
8	Gunakan lampu UV untuk memvisualisasikan jarak tempuh noda. Gambarkan lingkaran pada setiap noda yang terlihat dengan hati-hati.		Untuk mengetahui jarak tempuh noda	Terlihat batas noda pada plat TLC ketika disinari lampu UV
9	Tentukan nilai Rf  dan identifikasi senyawa yang tidak diketahui pada percobaan.		Untuk mengetahui nilai Rf dari masing-masing senyawa yang tidak diketahui sehingga dapat diidentifikasi	Masing-masing noda dapat ditentukan nilai Rf dengan menghitung jarak tempuh noda dan jarak tempuh pelarut melalui persamaan : Rf =
10	Letakkan plat TLC yang telah digunakan pada wadah limbah yang disediakan dan buang fasa gerak pada tempat limbah yang sesuai.			Plat TLC dan fasa gerak dibuang sesuai pada wadah limbah

VIII. PEMBAHASAN

Berdasarkan percobaan yang telah diamati pada video, dapat diketahui proses kromatografi lapis tipis dapat dilakukan untuk melakukan proses pemisahan senyawa dan mengidentifikasi senyawa yang tidak diketahui. Dalam proses kromatografi ini, terdapat dua fasa, yaitu fasa gerak dan fasa diam. Senyawa yang diguanakan sebagai fasa gerak adalah methanol, etil asetat, kloroform dan kloroform : methanol dengan perbandingan 10:1. Sedangkan fasa diam yang diguanakan adalah senyawa yang tidak diketahui (terdiri dari asetil asetat, kafein, dan dua senyawa lain yang tidak diketahui).

    Untuk melakukan proses kromatografi lapis tipis, digunakan suatu plat TLC yang sebelumnya digambar sebuah garis dengan jarak 1 cm dari dasar plat secara lembut dengan menggunakan pensil. Kemudian, dibuat 4 buah titik dengan jarak masing-masing 1 cm dan beri tanda A (asetil asetat), C (kafein), P  dan  X serta beri tanda pada pojok kanan atas untuk pelarut atau fasa gerak yang digunakan masing-masing pada 4 buah plat TLC. Selanjutnya, dilakukan penotolan sampel dengan tabung kapiler, di mana sebelum dilakukan penotolan sampel lainnya dibersihkan terlebih dahulu tabung kapiler dengan etanol untuk menghindari kontaminasi bahan agar hasil akhir yang diperoleh baik dan sempurna. Setelahnya, plat TLC diletakkan tegak lurus menggunakan penjepit ke dalam fasa gerak. Tujuannya agar proses kromatografi berjalan baik dan sempurna. Setelah beberapa saat, pelarut atau fasa gerak akan teradsorpsi pada plat TLC dan noda sampel bergerak naik pada plat. Setelah fasa gerak mencapai jarak 1 cm dari ujung atas plat TLC, dibuat garis pada bagian atas batas pelarut dengan hati-hati menggunakan pensil untuk memberi batas jarak tempuh pelarut. Lalu, dibiarkan plat TLC untuk menguapkan pelarut. Dalam mengamati jarak tempuh noda yang tak terlihat, digunakan lampu UV sehingga noda dapat terlihat dengan jelas. Untuk itu, dilingkari noda setelah terlihat dibawah sinar lampu UV. Berikut ini hasil penyinaran dengan lampu UV sehingga jarak masing-masing noda dapat diketahui yang ditandai dengan lingkaran

    Setelah diketahuinya jarak tempuh noda, maka dapat dilakuan perhitungan nilai Rf, di mana nilai Rf ditentukan dari hasil perbandingan jarak tempuh noda dengan jarak tempuh pelarut. Berikut ini hasil perhitungan nilai Rf senyawa yang tidak diketahui yang digunakan pada video

IX.   PERTANYAAN

1.    Mengapa jarak noda dari senyawa yang digunakan memberikan hasil yang berbeda pada masing-masing pelarut?

2.      Bagaimana cara menentukan nilai Rf dari hasil pemisahan kromatografi?

3.     Berdasarkan hasil yang diperoleh, apa yang membedakan antara fasa gerak, fasa diam dan pelarut?

X.   KESIMPULAN

1.  Kromatografi Lapis Tipis atau Thin Layer Chromatography (TLC) merupakan salah satu golongan kromatografi planar dengan bentuk pemisahan yang fleksibel untuk memisahkan campuran yang tidak volatil, sehingga tidak heran banyak digunakan secara konvensional.

2.  Pemisahan dengan cara TLC dilakukan dengan menggunakan plat TLC yang dilapisi dengan silica gel/alumina/selulosa dan diberikan garis dari dasar pada jarak 0,5 – 1 cm serta diberikan tanda titik untuk menotolkan sampel. Selanjutnya, plat direaksikan dengan fasa gerak dengan memperhatikan plat harus tegak lurus dan tidak boleh terendam serta bergerak sehingga tidak merusak noda. Dengan demikian, nilai Rf dapat ditentukan dan sampel yang digunakan dapat diidentifikasi.

XI.  DAFTAR PUSTAKA

Day, R.A., dan A.L. Underwood. 2002. Analisis Kimia Kuantitatif Edisi Keenam. Jakarta : Erlangga https://books.google.co.id/books?id=63qleQuMe40C&printsec=frontcover#v=onepage&q=kromatografi%20lapis%20tipis&f=true (diakses pada 28 April 2021).

Wulandari, Lestyo. 2011. Kromatografi Lapis Tipis. Jember : PT. Taman Kampus Presindo https://repository.unej.ac.id/bitstream/handle/123456789/77393/Lestyo%20W_Buku_ISBN%20978-979-17068-1-0_Kromatografi%20Lapis%20Tipis_(Farmasi).pdf?sequence=1 (diakses pada 28 April 2021).

Oktaviantari, D. Eka., dkk. 2019. Identifikasi Hidrokuinon dalam Sabun Pemutih Pembersih Wajah pada Tiga Klinik Kecantikan di Bandar Lampung dengan Metode Kromatografi Lapis Tipis dan Spektrofotometri UV-Vis. Jurnal Analis Farmasi. Vol.4 No. 2. http://ejurnalmalahayati.ac.id/index.php/analisfarmasi/article/download/2071/pdf (diakses pada 28 April 2021).