JURNAL PRAKTIKUM KIMIA ORGANIK I : KROMATOGRAFI KOLOM

 JURNAL PRAKTIKUM KIMIA ORGANIK I

"KROMATOGRAFI KOLOM"

SUCI ROHANA PUTRI TAMBUNAN

A1C119050

REGULER B

DOSEN PENGAMPU :

Dr. Drs. SYAMSURIZAL, M.Si

PRODI PENDIDIKAN KIMIA

JURUSAN MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN

UNIVERSITAS JAMBI

2021

PERCOBAAN KE-12

I.    JUDUL                         : KROMATOGRAFI KOLOM

II.  HARI, TANGGAL      : Senin, 10 Mei 2021

III. TUJUAN                      : Berikut tujuan dari percobaan ini, adalah :

1.  Untuk dapat mengetahui metode pemisahan Column chromatography.

2.  Untuk dapat mengetahui faktor yang mempengaruhi keberhasilan kromatografi kolom.

IV.  LANDASAN TEORI

Adanya beda korelasi antara komponen dan fasa dalam campuran menjadi prinsip penguraian kromatografi. Dalam proses penguraian kromatografi, terjadi beragam interaksi pada sampel dan fasa. Gaya yang timbul akan mengakibatkan efek berbeda dan khusus yang berbeda antara sebuah komponen dengan lainnya terhadap fasa (Rubiyanto,2017) https://books.google.co.id/booksid=7RInDwAAQBAJ&printsec=frontcover&hl=id&source=gbs_ge_summary_r&cad=0#v=onepage&q&f=false

Column chromatography dikategorikan sebagai kromatografi serapan dan preparatif. Jenis pemisahan ini dimanfaatkan untuk memurnikan senyawa dari campurannya dengan menggunakan kolom, sesuai dengan namanya column chromatography. Pada pemisahan ini lebih menguntungkan karena dapat dilakukan pada sampel yang sangat kecil, selektif, waktu relatif singkat dan sederhana (Oxtoby, 2003) https://www.google.co.id/books/edition/_/sfHquVdOGSAC?hl=id&gbpv=1

Penggunaan column chromatography didasarkan pada penyerapan penyusun campuran dengan afinitas yang berbeda pada permukaan fasa diamnya. Apabila afinitasnya besar maka akan tertahan pada fasa diam dan sebaliknya akan mengalir bersama fasa gerak. Dengan metode ini, digunakan sebuah kolom sehingga dapat diketahui banyaknya penyusun yang keluar pada kolom tersebut (Setyaningrum,2016) http://journal.unnes.ac.id/sju/index.php/ijcs/article/download/9187/6762

V.   ALAT DAN BAHAN

5.1 Alat

1.  Kolom kromatografi

2.  Cincin penjepit

3.  Pompa udara

4.  Tabung reaksi

5.  Rak tabung reaksi

6.  Batang kolom

7.  Pipa karet

8.  Pipet kaca

9.  Corong

10. Gelas kimia

11. Pengaduk

12. Statif

5.2  Bahan

1. Pasir

2. Silika gel

3. Kapas  

4. Sampel yang mengandung klorofil dan beta-karotin

5. Heksana

6. Heksana : EtAc dengan perbandingan 1:1

7. Aseton

VI.  PROSEDUR KERJA

1. Dibuat bulatan kecil kapas dan dimasukkan pada kolom. Padatkan dengan menekannya menggunakan batang kolom sampai mendekati keran. Jangan gunakan kapas yang terlalu besar dan ketat dalam memapatkannya karena akan mempengaruhi aliran menjadi lebih lambat. Kemudian, dipasang kolom pada statif.

2. Dimasukkan pasir pada kolom menggunakan corong dan ratakan.

3. Diambil 2 sendok silika gel dan masukkan pada gelas kimia. Dilarutkan dengan menggunakan heksana secara perlahan dan aduk hingga rata. Pastikan tidak ada gelembung dan menjadi bubur homogen.

4. Ditambahkan 5 ml heksana ke dalam kolom.

5. Dibuka keran untuk memeriksa aliran cairan bekerja dengan baik.

6. Dimasukkan bubur silika gel ke dalam kolom secara perlahan agar tidak terbentuk gelembung udara.

7. Dibuka kembali keran, bilas silika gel yang tersisa pada gelas kimia dengan heksana pada kolom dan masukkan pada kolom. Dibilas dinding kolom dengan heksana.

8. Gunakan pipa karet untuk mengetuk kolom secara perlahan agar silika gel mengendap secara merata.

9. Hubungkan pompa udara dengan kolom, dengan cara memasukkannya pada mulut kolom dan dikencangkan dengan cincin penjepit. Perhatikan aliran cairan menjadi lebih cepat. Perhatikan pula miniskus eluen, pastikan agar kolom tidak kering. Pelarut harus berada di atas silika gel. Ketika miniskus hampir mencapai silika gel, lepas cincin penjepit dan tahan menggunakan tangan untuk mengontrol aliran cairan.

10. Bilas bagian dalam kolom dengan heksana. Pasang kembali pompa udara, pastikan tidak ada gelembung udara.

11. Setelah kolom dipastikan tidak ada gelembung udara, dimasukkan sedikit pasir sehingga silika gel tidak terganggu ketika dilakukan kromatografi kolom. Dibilas pasir pada dinding kolom dengan heksana.

12. Dimasukkan sampel yang telah dilarutkan dengan metil klorida ke dalam kolom secara merata melalui dinding kolom.

13. Dibuka keran agar sampel mengalir menuju silika gel dan tambahkan heksana. Perhatikan meniskus, jangan biarkan kolom menjadi kering dengan menambahkan eluen secara hati-hati dan perlahan dengan gerakan melingkar. Eluen/pelarut harus selalu berada diatas silika gel.

14. Dipasangkan kembali pompa udara. Perhatikan cairan yang berwarna kuning bergerak cepat ke bawah karena bersifat sangat nonpolar.

15. Diganti tabung reaksi yang menampung cairan dengan tabung reaksi lain apabila sudah terisi penuh. Pegang leher kolom, bila terasa panas maka komponen pertama telah keluar/terelusi.

16. Setelah komponen pertama terelusi sempurna dari kolom, ganti pelarut dengan menggunakan heksana : EtAc dengan perbandingan 1:1. 

17. Tambahkan kembali pelarut, dipasangkan kembali pompa udara dan tamping cairan yang terelusi. Perhatikan miniskus, jangan biarkan kolom kering. 

18. Ketika cairan berwarna hijau mencapai keran, ganti tabung reaksi. Diganti kembali tabung reaksi setelah cairan hijau telah tertampung semua. 

19. Verifkasi hasil identifikasi dengan menggunakan kromatografi lapis tipis.

20. Setelah selesai memperoleh seluruh senyawa, lepas kembali pompa udara, keluarkan semua pelarut dan keringkan kolom. Buang silika gel pada wadah limbah silika dengan menggunakan pipa karet untuk mengetuk kolom agar dapat keluar sempurna. Jika sulit, maka bilas dengan sedikit aseton. 

Berikut ini link video YouTube yang digunakan pada percobaan ini :

https://www.youtube.com/watch?v=ci2uu9Cuf5s

PERTANYAAN

1. Berdasarkan video, apa fungsi dari bulatan kapas yang dimasukkan ke dalam kolom

2. Berdasarkan video, mengapa perlu dilakukakan penambahan pasir sebanyak dua kali

3. Berdasarkan video, apa fungsi dari silika gel?